警惕!沈阳发生高致病性禽流感疫情!新兴分子诊断技术能帮几何?

4月12日,农业农村部新闻办公室发布,辽宁省沈阳市发生野禽H5N6亚型高致病性禽流感疫情。

警惕!沈阳发生高致病性禽流感疫情!新兴分子诊断技术能帮几何?

4月12日,农业农村部接到中国动物疫病预防控制中心报告,经国家禽流感参考实验室确诊,沈阳市和平区长白街长白岛森林公园发生野禽H5N6亚型高致病性禽流感疫情。疫点内共有野禽291只,发病死亡11只。

疫情发生后,当地立即启动应急响应机制,开展应急处置工作,扑杀野禽280只,对全部病死和扑杀禽只进行无害化处理,对周边环境进行消毒。

一、全球禽流感集中爆发!

1.德国多地区发生H5N8型高致病性禽流感疫情

据世界动物卫生组织(OIE)消息,2021年4月8日,德国联邦食品与农业部向OIE报告称,德国多地区发生H5N8型高致病性禽流感疫情。

此次疫情发生地为北莱茵-威斯特法伦州的帕德博恩市、明斯特市、梅基施县、瓦伦多夫市、明登-吕贝克县、霍赫绍尔县和居特斯洛市,疫情源头未知或不确定。经临床与实验室检测发现,有111126只禽类疑似受到感染,其中44495只发病,3049只死亡,杀死和处置108077只。

2.日本栃木县、宫崎县等地发生H5N8型高致病性禽流感疫情

4月7日,日本栃木县( Tochigi)、宫崎县( Miyazaki)等2地发生2起家禽H5N8亚型高致病性禽流感疫情,2113只家禽感染死亡,11.6万只被扑杀。

3.波兰多地发生H5N8型高致病性禽流感疫情

4月7日,波兰大波兰省、奥波莱省等2发生18起家禽H5N8亚型高致病性禽流感疫情,16.6万只家禽感染,3207只死亡,28.4万只被扑杀

另外,据新加坡食品局(SFA)发布消息称,由于美国暴发低致病性禽流感疫情,新加坡将对其禽类产品实施临时禁令。

自2021年3月25日和29日起,新加坡将对受疫情影响地区周围10公里内的家禽及其产品的进口实施临时限制。

综合来看,全球禽流感再次集中爆发,国内一地再次“中招”,目前新冠状病毒肺炎疫情还在抗击中,结合全国活禽市场陆续关闭来看,短期内鸡价和鸡蛋的价格或受影响。对于鸡肉能否安全食用?世界动物卫生组织(OIE)表示,只要肉类产品在制备过程中被正确烹饪和处理,便可安全食用鸡肉。

二、什么是H5N6禽流感病毒?

H5N6禽流感病毒与H5N1、H7N9等亚型禽流感病毒都属于甲型流感病毒,大部分对家禽具有高致病性,自2008年在我国家禽中首次发现以来,目前已逐渐取代H5N1禽流感病毒成为我国家禽和活禽市场中流行的主要病毒。在自然状态下,H5N6禽流感病毒主要感染家禽,感染人的事件极少发生,截至2021年3月底,全球仅报道25人感染,且均为散发。

禽流感病毒对热比较敏感,65°C加热30分钟或煮沸(100°C)2分钟以上可灭活。

三、禽流感检测方法介绍

高致病性禽流感病毒(AI)由于人畜共患传染而成为现在对公众健康构成重大威胁的病毒。它给卫生服务带来了额外的负担,并且由于禽类患病而影响企业利益,而这最终会给国家和世界的经济带来负面影响。最近由于高致病性禽流感病毒而引起的野生鸟类和养殖家禽禽流感的重新爆发表明我们迫切需要快速、敏感的检测方法。目前而言,基于PCR和抗原的检测禽流感病毒的方法是用得较多的方法。

PCR 和 RT-PCR

近几年发展起来的荧光定量RT-PCR分子诊断技术,配合荧光定量PCR仪可以从基因水平检测禽流感RNA基因,具有高度的敏感性和特异性,并且可大大地缩短对AI病毒的检出时间,克服了传统的禽流感诊断技术包括病毒分离鉴定试验周期长的缺点,为禽流感早期快速诊断提供了敏感、快速、实用的检测方法。

等温扩增方法

快速可靠的检测技术可以在早期成功的检测到病毒。病毒的DNA序列在成功预防这种疾病过程中起到重要作用。

为了实现这一目标,一种基于等温核酸扩增技术的ERA技术正在兴起,苏州先达基因自主研发了一套能够高效扩增痕量DNA/RNA模板的组合酶制剂。通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增数十亿倍,在20分钟内就可以得出检测结果。

警惕!沈阳发生高致病性禽流感疫情!新兴分子诊断技术能帮几何?

同时,先达基因将等温扩增(ERA)技术和单分子荧光检验技术结合于一体,实现了扩增过程的实时检测,大量扩增后的产物能够与带有荧光标记的探针相结合,从而产生特定的荧光。该荧光信号可由内置荧光检测仪实时捕获,直观反映扩增循环情况。仪器操作简便,简单培训即可上手操作仪器;控温精度高,升温速度快,单次可检测多个样本;携带方便,相比于普通PCR需要2-3小时,实时荧光PCR的1.5-2小时,荧光恒温扩增仪只需要20 分钟,能够现场检测快速出具报告,极大缩短了检测时间。

这种革新的方法是处理监测点现场样品时,是一种低成本、高效率及实用的方法。现已开发出有关动物疫病检测科研试剂盒,产品涵盖非洲猪瘟、猪腹泻、猪细小、猪圆环及各类禽流感等。

四、人如何有效预防H5N6禽流感?

尽管H5N6禽流感病毒极少感染人,但也应引起高度重视,避免因人为因素造成疫情发生和传播。

1.尽量避免与活禽直接接触;

2.尽量不要购买没有检疫合格证明的禽肉产品;

3.烹饪时砧板和菜刀要生熟分开,切禽肉的砧板和菜刀用后要经开水烫;

4.食用完全煮熟的禽肉、禽蛋及相关产品。

总结

分子诊断方法有很多优点,如较高的特异性和灵敏度,复合形式,能够适应任何样品类型,最小的接触传染性样品,快速检测等优势。一般来说,PCR技术仍旧是用在禽流感检测中的主要技术手段,目前,在分子生物学检测方面,由于对技术要求水平适中、相对便宜和快速的样品筛查等优点实时定量反转录PCR技术成为应用最广泛的技术。但是,禽流感检测方法的最终选择取决于实验室能力和设施。PCR方法的主要缺点是设备运行的高成本,且对实验室要求较高,还无法做到现场即时检测。

为了确保足够的效率和可靠性,及时即地的确认是否携带有禽流感病毒,新兴的等温扩增方法须尽快地通过的验证。利用分子诊断技术获得对应结果,对快速应急处理工作是很重要的。

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